Nouveau moyen simple de détecter le COVID-19 dans le plasma sanguin

Alors même que la pandémie COVID-19 revendique un nombre croissant de patients, le nombre de tests augmente dans la plupart des pays à la fine pointe. Cependant, le test actuel de réaction en chaîne de la transcriptase inverse-polymérase (RT PCR) est souvent indisponible et prend jusqu'à plusieurs jours pour que les résultats arrivent.

Maintenant, une nouvelle étude publiée sur le serveur de pré-impression medRxiv * en juillet 2020 rapporte l'utilisation potentielle de microclots dans le plasma de patients COVID-19 comme test phénotypique rapide de la maladie.

Outre le retard inhérent à l'utilisation de la RT PCR sur des écouvillons nasopharyngés ou oropharyngés, la procédure est désagréable pour la plupart des gens, et certains scientifiques remettent en question sa sensibilité. Ainsi, un nouveau test plus rapide avec une meilleure sensibilité et une signification pronostique accrue serait le bienvenu. Cela aiderait à trier les patients pour une hospitalisation ou une surveillance étroite en fonction de la gravité prévue de la maladie au moment de la présentation.

Le seul test actuellement disponible qui répond à ces normes est la tomodensitométrie thoracique (TDM) pour détecter la pneumonie, mais ce n'est ni peu coûteux ni très spécifique, bien qu'il ait une sensibilité élevée. De plus, il n'est disponible que dans les centres spécialisés.

Crédit d'image: Iryna Kalamurza / Shutterstock

Coagulation sanguine dans COVID-19

De nombreux articles ont reconnu la présence de caillots sanguins répandus et leur rôle dans la maladie grave du COVID-19. Cependant, une hémorragie étendue peut également aggraver l'issue chez les patients atteints de ces infections, et ce phénotype a également été reconnu. Le facteur commun à ces deux manifestations de fin de spectre est la réalisation qu'il s'agit de phases précoces et tardives du même processus de coagulation désordonné.

Dans la phase initiale, des caillots excessifs se forment et une fibrinolyse partielle se produit, provoquant une augmentation des niveaux de D-dimères qui se sont avérés être caractéristiques de résultats moins bons. Au fur et à mesure que la formation du caillot progresse et se prolonge, les taux de fibrinogène et de facteur de von Willebrand (vWF) diminuent, ainsi que le nombre de plaquettes. Cela conduit à la deuxième phase de saignement excessif, y compris une coagulation intravasculaire disséminée, qui peut être une manifestation mettant la vie en danger.

En reconnaissance de cela, les chercheurs ont suggéré l'utilisation d'un traitement anticoagulant plus tôt dans la maladie, avec une surveillance attentive du patient via les paramètres de coagulation sérique, pour améliorer le résultat.

Dépôts fibreux ou cellulaires dans les frottis plasmatiques des patients COVID-19

Dépôts fibreux ou cellulaires dans les frottis plasmatiques des patients COVID-19

Nature des caillots

Dans le COVID-10 sévère, les troubles de la coagulation sont associés à d'autres signes de lésion tissulaire étendue tels que des taux élevés de ferritine et l'apparition d'une tempête de cytokines plus tard au cours de la maladie. La présence d'un excès de fer est un déclencheur établi de la formation de caillots amyloïdes, et ces signes ne sont pas propres au COVID-10. Au contraire, ils surviennent dans toutes les conditions inflammatoires.

Les chercheurs reviennent à leurs recherches antérieures, qui ont montré que le fibrinogène sanguin pouvait coaguler sous une forme anormale et amorphe appelée caillots amyloïdes lorsqu'il était exposé à certains composés chimiques dans les parois des cellules microbiennes et dans plusieurs conditions inflammatoires chroniques. Les caillots amyloïdes sont détectés à l'aide de thioflavine T, d'un colorant fluorescent ou de colorants Amytracker. Dans des recherches publiées, ces caillots se sont formés in vitro, en utilisant du plasma auquel de la thrombine, un autre facteur de coagulation, avait été ajoutée.

L'étude: les caillots amyloïdes en PPP

Les chercheurs ont utilisé 20 échantillons de 11 patients masculins et 9 femmes atteints de COVID-19, prélevés avant le début de tout traitement. Ces échantillons ont été conservés sous forme de plasma pauvre en plaquettes. Il y avait aussi des échantillons de 10 témoins d'âge et de sexe similaires, prélevés dans la banque de plasma. Aucun des témoins n'était fumeur; tous avaient une protéine C-réactive normale et n'étaient pas sous anti-inflammatoire. L'âge moyen était d'environ 50 ans et 49 ans pour les patients et les témoins.

Parmi les patients infectés, 10/20 ont finalement été renvoyés chez eux pour observation après avoir prélevé des échantillons de sang. Pour les maladies modérées ou sévères, des scanners thoraciques ont été réalisés. Par conséquent, les performances de la tomodensitométrie ont été utilisées pour classer les patients de l'étude comme souffrant d'une maladie légère, modérée ou grave. La microscopie fluorescente a été utilisée pour détecter les caillots amyloïdes dans les PPP des patients et des témoins.

Contrairement aux caillots trouvés dans leur étude précédente, le plasma des patients COVID-19 a montré le même type de caillots, mais les enquêteurs commentent, « les signaux étaient si massifs qu'ils étaient essentiellement hors de l'échelle.«Et en fait, ce plasma contient une énorme quantité de caillots amyloïdes déjà existants sans avoir besoin d'ajouter de la thrombine.

Implications

Les chercheurs disent que c'est une autre des caractéristiques cliniques uniques du COVID-19. Cela explique à la fois pourquoi des microclots répandus se forment et comment il faut l'éviter en tant qu'étape de traitement primaire, en utilisant des anticoagulants.

Les microclots nécessitent une surveillance étroite par thromboélastographie (TEG) ou des techniques similaires pour empêcher le patient de progresser vers la deuxième phase, caractérisée par une hémorragie. Ici, TEG a l'avantage d'offrir la possibilité d'étudier à la fois le sang total et le PPP pour les paramètres de coagulation.

Le TEG de sang total permet d'évaluer la coagulation en présence de plaquettes et de fibrinogène, initiateur de la cascade de coagulation. PPP TEG permet uniquement de tester la coagulation à médiation par les protéines plasmatiques.

Bien que l'étude actuelle ait utilisé la microscopie à fluorescence, le TEG est une option utile, étant disponible au point de service, peu coûteux et fiable. Les chercheurs décrivent le test qu'ils ont utilisé comme étant facile, rapide et bon marché, ne prenant que 40 minutes, y compris un temps d'incubation de 30 minutes. Ils sont d'avis: «Ceci fournit donc un test rapide et pratique pour le COVID-19.»

TEG est également utile pour détecter l'étendue de la dégradation du caillot. Certains chercheurs ont rapporté une suppression complète de la fibrinolyse à 30 minutes par TEG, ce qui est inestimable pour prédire la survenue de la thromboembolie dans COVID-19. La nature amyloïde des microclots fréquemment observés chez les patients COVID-19 explique pourquoi cette fibrinolyse est complète et pourquoi l'hypoxémie survient si souvent, soulignant la nécessité de la prévenir par un traitement précoce.

*Avis important

medRxiv publie des rapports scientifiques préliminaires qui ne sont pas évalués par des pairs et, par conséquent, ne doivent pas être considérés comme concluants, orienter la pratique clinique / les comportements liés à la santé ou être traités comme des informations établies.

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